Главная » Операции, процедуры, тесты, Полный перечень статей » Методы генетического тестирования
Тип генетического тестирования всегда зависит от типа измеряемой ненормальности. В общем можно выделить три категории генетического тестирования — молекулярные, цитогенетические и биохимические. Все эти типы тестирования доступны для обнаружения нарушений в структуре хромосом, функций белков и последовательностей ДНК.
Молекулярное тестирование
Прямой анализ ДНК применим, когда известна последовательность генов. Для небольших мутаций прямое тестирование ДНК обычно является наиболее эффективным методом, особенно если функция белка неизвестна и биохимический тест не может быть разработан. Тест на ДНК может быть проведен на любом образце ткани и требует очень небольшого количества образца. Для проведения тестирования можно использовать несколько различных молекулярных технологий, включая прямое секвенирование, анализы на основе полимеразной цепной реакции (ПЦР) и гибридизацию. ПЦР представляет собой обычную процедуру, используемую для амплификации целевых сегментов ДНК посредством повторяющихся циклов денатурации, отжига и удлинения цепи. Затем амплифицированный продукт можно тестировать.
Сравнительная геномная гибридизация или ДНК-микрочип представляет собой молекулярно-цитогенетический метод анализа коэффициентов усиления или потерь в ДНК, которые не обнаруживаются при рутинном анализе хромосом. Метод основан на пропорции флуоресцентно меченной ДНК пациента с нормальной ДНК. Сравнительной геномной гибридизацией можно обнаруживать небольшие делеции и дупликации, но не структурные хромосомные изменения, такие как сбалансированные взаимные транслокации, инверсии или изменения количества хромосомных копий.
Цитогенетическое тестирование
Цитогенетика включает в себя исследование хромосом для выявления структурных аномалий. Хромосомы разделяющейся клетки человека могут быть четко проанализированы в лейкоцитах, в частности Т-лимфоцитах, которые легко собираются из крови. После получения, клетки культивируются и по завершению этого процесса хромосомы фиксируются на предметных стеклах и окрашиваются. Методы окрашивания для рутинного анализа позволяют идентифицировать каждую из хромосом. Четкие полосы каждой хромосомы, выявленные окрашиванием, позволяют специалистам анализировать хромосомную структуру.
Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) представляет собой процесс, который наглядно визуализирует хромосомные аномалии (например, инсерции, делеции, транслокации и амплификации). FISH обычно используется для идентификации специфических хромосомных делеций, связанных с детскими синдромами и некоторыми раковыми заболеваниями.
Биохимическое тестирование
В биохимическом тестировании ученные работают с белками вместо генов. Многие биохимические генетические заболевания известны как «врожденные ошибки метаболизма», потому что они присутствуют при рождении и нарушают ключевой метаболический путь. В зависимости от заболевания ученные могут применять различные тесты для непосредственного измерения активности белка (прямое измерение активности фермента), уровня метаболитов (косвенное измерение активности фермента) и размера или количества белка (структуры белка). Эти тесты требуют образца ткани, в котором присутствует необходимый белок. И поскольку генные продукты могут быть более нестабильными, чем ДНК или РНК, полученные образцы необходимо собирать и хранить надлежащим образом (в соответствии со спецификациями лаборатории).
Ещё новости: