Главная » Новости проекта » Методы выделения клеток
Хотя органеллы и большие молекулы в клетке могут быть визуализированы с микроскопами, понимание того, как эти компоненты функционируют требует детального биохимического анализа. Большинство биохимических процедур требуется для получение большого количества клеток, а затем их необходимо физически изолировать (сегодня также есть новые методы выделения, о которых мы в этой статье не поговрим, о них вы можете прочитать в статье https://www.ter-ritoria.ru/). Если образец, кусок ткани, состоит из различных типов клеток, гетерогенные популяции клеток будут смешаны вместе. Чтобы получить столько информации, сколько возможно об отдельном типе клеток, биологи разработали способы диссоциации клеток из тканей и методы разделения различных типов. Эти манипуляции приводят к относительно однородной популяции клеток, которые затем могут быть проанализированы либо размножены. Первым шагом в изоляции клеток единого типа из ткани, которая содержит смесь некоторых типов клеток является нарушение внеклеточного матрикса, который удерживает клетки вместе. Лучший выход жизнеспособных диссоциированных клеток обычно получают из плода или новорожденных тканей. Образец ткани обычно обрабатывают протеолитическими ферментами (например, трипсин и коллагеназа) перевариющими белки внеклеточного матрикса и агенты, которые связываются с Ca2+ , на котором держится адгезия клетка-клетка. В таком случае, ткань может разобраться на отдельные клетки легким помешиванием. Некоторые подходы используются для разделения различных типов клеток из смешанной клеточной суспензии. Один метод использует различия в физических свойствах. Крупные клетки могут быть отделены от мелких клеток и плотные клетки от светлых клеток путем центрифугирования, например. Другой подход основан на тенденции некоторых типов клеток придерживаться стекла или пластика, которые позволяют им быть отделены от клеток, которые прилипают менее сильно. Важный параметр этого последнего метода зависит от конкретных свойств антител связывания. Антитела, которые специфически связываются с поверхности только одного типа клеток в ткани могут быть связаны с различными матрицами, такими как коллаген, полисахарид, пластик или формировать сродство поверхности, которую признают антитела.
Ещё новости: